膠原類的特點(diǎn)以及檢測方法
查看詳情膠原，主要存在于動物結(jié)締組織中的結(jié)構(gòu)蛋白，是哺乳動物中含量最豐富的蛋白質(zhì)，占到了整個(gè)體內(nèi)蛋白含量的25-35%。膠原可分為纖維型和非纖維型。最常見的是Type I，Type II，Type III，Type IV，Type V。其中Type I，II，III，V均是纖維型，而Type IV是非纖維型。人體絕大多數(shù)組織器官都含有膠原，目前為止共發(fā)現(xiàn)了28種膠原，而90%以上都是一型膠原。膠原可用于整容外科手術(shù)，骨移植，組織再生，傷口治愈等方面；然而膠原突變會引起各類疾病包括成骨不全癥，軟骨發(fā)育不全，埃勒斯-當(dāng)洛斯綜合征，遺傳性進(jìn)行性腎炎，骨質(zhì)疏松癥，Knobl......
單抗還是多抗？多肽還是重組蛋白？
查看詳情我們收到這樣一個(gè)定制抗體的訂單詢問，我要定制一個(gè)針對小鼠Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)某一段序列的抗體，這段序列包含35-55位氨基酸，那么我是需要單克隆抗體好還是多克隆抗體好？制備抗體的時(shí)候是用多肽作為免疫原好還是用重組蛋白作為免疫原好呢？首先，我們來看看單克隆抗體和多克隆抗體的主要區(qū)別在哪里呢？單克隆抗體是針對單一抗原決定簇，來自單個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆的抗體，多克隆抗體是針對多個(gè)抗原決定簇，由多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體。通常來說一個(gè)含有多個(gè)抗原決定簇的大分子免疫原進(jìn)入機(jī)體后，其不同......
常見免疫檢測的抗體標(biāo)記種類
查看詳情標(biāo)記抗體是免疫電鏡樣品制備的一種常見方法，該技術(shù)由于操作簡單、靈敏度高，常應(yīng)用于IHC，WB，ICC，ELISA等實(shí)驗(yàn)。通過標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)來定位分析抗原，是目前市面上理想的快速價(jià)廉的定量檢測方法?？贵w標(biāo)記主要有酶標(biāo)記、熒光素標(biāo)記、同位素標(biāo)記、生物素標(biāo)記等，還有一些其他的標(biāo)記方法例如膠體金標(biāo)記，下面具體來展示云克隆公司研發(fā)的抗體標(biāo)記種類：1、辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記，HRP標(biāo)記單抗和多抗的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，隨后與抗體蛋白的氨基結(jié)合，形成Schiff堿。常用的HRP的底物有鄰苯......
APOB家族及其受體的檢測
查看詳情人體APOB由APOB基因進(jìn)行編碼，血漿中極低密度脂蛋白(VLDL )，中間密度脂蛋白(IDL)中均含有APOB。APOB的水平變化與脂質(zhì)代謝，動脈粥樣硬化等腦血管等疾病密切相關(guān)，是目前臨床研究的熱點(diǎn)。APOB在LDL中發(fā)揮作用的機(jī)理功能尚待研究。血漿中APOB以APOB48和APOB100這兩種形式存在，其中APOB48主要在小腸中合成，而APOB100主要在肝臟中合成。APOB100是APOB群中最大的蛋白，通常提到的APOB實(shí)際上指的就是APOB100，它有4563個(gè)氨基酸。APOB48與APOB100有共同的N端結(jié)構(gòu)，它是由編碼APOB100的基因序列在第2153個(gè)氨基酸處產(chǎn)生了終止密碼子而編碼......
免疫組織化學(xué)原理圖
查看詳情免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)，是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，對相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位、定量測定的一項(xiàng)新技術(shù)。原理圖如下：最常選用的免疫學(xué)檢測方案之一。免疫組化實(shí)驗(yàn)中抗原修復(fù)方法的選擇，抗體工作濃度的確定和染色方案等步驟都是決定實(shí)驗(yàn)成敗與否的關(guān)鍵。許多實(shí)驗(yàn)人員面對繁瑣的實(shí)驗(yàn)步驟，往往得到了不盡如人意的結(jié)果。在此，提前告訴大家一個(gè)好消息，Cloud-clone. Corp已開展免疫組化代測服務(wù)！??！具體情況，會在下一次的專題中公布，敬請期待！更多信息，請查閱htt......
重組蛋白的詳細(xì)構(gòu)建方法
查看詳情應(yīng)用重組DNA將目標(biāo)基因進(jìn)行表達(dá)得到的蛋白質(zhì)成為重組蛋白，重組蛋白在生物信號傳導(dǎo)過程，藥物研發(fā)，科學(xué)研究中扮演著重要角色。下面來介紹一下重組蛋白的生產(chǎn)工藝流程。1.基因擴(kuò)增（1）引物合成搜索目標(biāo)蛋白基因信息，結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)信息，選取片段或全長設(shè)計(jì)引物。注意避開跨膜區(qū)，以及復(fù)雜的二級結(jié)構(gòu)，優(yōu)選N端或C端，引物評分盡可能高，并搜索出核酸序列的酶切位點(diǎn)，使用載體等信息。經(jīng)研發(fā)部根據(jù)研發(fā)經(jīng)驗(yàn)提出修改意見最終定稿后交由第三方公司進(jìn)行引物合成。（2）基因克隆機(jī)重組鑒定1）PCR根據(jù)目的蛋白特異性表達(dá)組織，選取特異......
雙抗夾心法CLIA檢測原理
查看詳情雙抗夾心化學(xué)發(fā)光法（CLIA）是將雙抗體夾心法與化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)結(jié)合在一起的檢測方法。它的一般實(shí)驗(yàn)步驟包括：將特異性針對待測抗原的抗體包被于 96 孔微孔板中，制成固相載體；向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，使待測抗原與連接于固相載體上的抗體結(jié)合；此后加入生物素化的針對待測抗原的抗體，形成夾心；再將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入 HRP 標(biāo)記的親和素，再次徹底洗滌后加入魯米諾發(fā)光底物，并用光子計(jì)數(shù)器，讀出各孔的相對光度值（RLU）。此法與雙抗夾心ELISA法的區(qū)別在于采用了增強(qiáng)型的ECL發(fā)光體系作為發(fā)光底物試劑來實(shí)......
免疫組織化學(xué)樣本處理I
查看詳情免疫組織化學(xué)用于觀察標(biāo)本的染色結(jié)果對靶抗原抗體進(jìn)行鑒定和定位，其標(biāo)本制備非常重要。在制作標(biāo)本過程中，需保持抗原的完整性，在染色、洗滌包埋等過程中避免發(fā)生溶解和變性，同時(shí)防止擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞或組織間隙中。圖1. IHC結(jié)果示意圖組織材料的處理是獲得良好免疫組織化學(xué)結(jié)果的前提，活體組織，各種體液及穿刺液和細(xì)胞都可以用于免疫組化分析，針對不同的標(biāo)本類型可以選擇不同的制備方法?；铙w組織常選用石蠟切片和冰凍切片處理，而體液、穿刺液及細(xì)胞樣本則選用涂片方式處理。對于細(xì)菌菌落或尸體病變組織，可將新鮮切面壓印于玻......