武漢云克隆科技股份有限公司

Q1. 試劑盒產(chǎn)品的規(guī)格有哪些？

A1. 在售試劑盒產(chǎn)品規(guī)格分為96T和48T。96T試劑盒含有12條板條，每條板條有8孔；而48T試劑盒含有6條板條，每個(gè)板條有8孔。

試劑組分如下：

Q2. 試劑盒收到后如何保存？

A2. 參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)[ 試劑盒的儲(chǔ)存及有效期 ]。

Q3. 樣本如何制備及保存？

A3. 參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)[ 標(biāo)本的采集與保存 ]

Q4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方法有哪些？

A4. 對(duì)于標(biāo)曲擬合推薦選用二項(xiàng)式、四參數(shù)方程、半對(duì)數(shù)和雙對(duì)數(shù)等擬合方法，可提供模板文件供老師們參考。

雙抗夾心試劑盒（二項(xiàng)式擬合）

http://www.gocciabike.com.cn/topic/201504010418350045.html

競(jìng)爭(zhēng)抑制試劑盒（半對(duì)數(shù)擬合）
http://www.gocciabike.com.cn/topic/201805311354357651.html

Q5. 檢測(cè)溶液A、檢測(cè)溶液B、標(biāo)準(zhǔn)品可不可以反復(fù)凍融或重復(fù)使用？

A5. 檢測(cè)溶液A和檢測(cè)溶液B以?xún)?chǔ)液的形式保存以保證其穩(wěn)定性，一次實(shí)驗(yàn)用多少則稀釋多少。例如：一次實(shí)驗(yàn)用16孔，則可制備1.7mL的檢測(cè)液A工作液（多制備100μL）。保存剩余未稀釋的檢測(cè)溶液A和檢測(cè)溶液B供下次使用。                 

標(biāo)準(zhǔn)品中一旦加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液則不能保存供下次使用，因?yàn)榈蜐舛鹊臉?biāo)準(zhǔn)品在保存過(guò)程中很容易降解。我們的試劑盒提供了兩瓶標(biāo)準(zhǔn)品，客戶(hù)可以做預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)使用一瓶，剩下未加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的一瓶保存供下次使用。為了得到精準(zhǔn)的結(jié)果，重懸過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品只能使用一次。

Q6. 試劑盒組分是否包含樣本稀釋液？如果沒(méi)有，選用哪種稀釋液稀釋樣本？

A6. 試劑盒組分不包含樣本稀釋液，推薦選用0.01M PBS稀釋樣本。云克隆提供商品化的PBS，貨號(hào)是IS045。

如果老師想要自行配置，推薦 0.01M PBS的配方如下：

Q7. 預(yù)實(shí)驗(yàn)是否必須要做？

A7. 預(yù)實(shí)驗(yàn)用于預(yù)測(cè)樣本中靶標(biāo)物的含量，以確定樣本最適稀釋比例。

對(duì)于血清血漿樣本，可以參考說(shuō)明書(shū)中推薦的稀釋比例，直接檢測(cè)。而其它類(lèi)型的樣本可能存在諸多影響靶標(biāo)物含量的干擾因素，如：組織樣本的干擾因素包括：組織類(lèi)型、提取方式、刺激處理方式等；細(xì)胞樣本的干擾因素包括：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間、刺激處理方式等；尿液&唾液&乳汁樣本的干擾因素包括：飲水量、采樣時(shí)間、采樣方式等。這些干擾因素均會(huì)直接影響樣本中靶標(biāo)物的濃度，建議實(shí)驗(yàn)前先通過(guò)預(yù)試驗(yàn)，預(yù)測(cè)樣本中靶標(biāo)物的含量，確定樣本最適稀釋比例，再進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。還有一些特殊樣本，如：陰道灌洗液、精液、齦溝液，試劑盒生產(chǎn)廠家不易獲取，也不會(huì)用于試劑盒的驗(yàn)證，且相關(guān)的研究報(bào)道不多，這類(lèi)樣本也有必要先做預(yù)試驗(yàn)，摸索合適的樣本稀釋比例，再開(kāi)展正式實(shí)驗(yàn)。 

Q8. 如何設(shè)計(jì)ELISA預(yù)實(shí)驗(yàn)？

A8. 預(yù)實(shí)驗(yàn)推薦方案：
1）選定實(shí)驗(yàn)樣本：預(yù)實(shí)驗(yàn)一般通過(guò)測(cè)定少數(shù)有代表性的樣本來(lái)確定正式實(shí)驗(yàn)方案。通常，不同組別的樣本由于處理或刺激，靶標(biāo)物的表達(dá)量會(huì)產(chǎn)生變化，建議從各組樣本中隨機(jī)選擇1-2例樣本。如果預(yù)實(shí)驗(yàn)的試劑量有限，那么至少選兩例樣品，1例為理論上靶標(biāo)物含量最低組的樣品，另1例為理論上靶標(biāo)物含量最高組的樣品。

2）確定最適稀釋比例：可根據(jù)樣本中靶標(biāo)物的濃度，選擇5倍或10倍梯度稀釋?zhuān)瑫r(shí)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品?？蛇x做完整的標(biāo)曲或部分濃度點(diǎn)（如空白孔、最低濃度孔、中間濃度孔及最高濃度孔）。將不同稀釋比例的樣本的O.D.值對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)品O.D.值，各樣本在某一稀釋比例的O.D.值分布在標(biāo)曲中值附近，則此為最適稀釋比例。需要注意的是在做預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要設(shè)置標(biāo)曲，不設(shè)置標(biāo)曲，就如同在丈量時(shí)沒(méi)有尺一樣，無(wú)法通過(guò)比較確定最適稀釋比例。

Q9. ELISA試劑盒適用于測(cè)定哪些樣本

A9. 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)第一頁(yè)[ INTENDED USE ]會(huì)給出適用的樣本類(lèi)型。對(duì)于沒(méi)有提及的樣本類(lèi)型，建議自行做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定是否適用。一般來(lái)說(shuō)，只要目的物含量在試劑盒檢測(cè)范圍內(nèi)的生物樣本就可以用于檢測(cè)。

Q10. ELISA試劑盒樣本如何處理？

A10. 對(duì)于ELISA試劑盒樣本處理方法，請(qǐng)參考以下鏈接：

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定實(shí)驗(yàn)（ELISA）常見(jiàn)樣本處理方法
常見(jiàn)樣本：血液樣本（血清、血漿）、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞上清、糞便、尿液以及腦脊液。
http://www.gocciabike.com.cn/topic/201804271043087152.html

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定實(shí)驗(yàn)（ELISA）-特殊樣本處理方法
特殊樣本：痰液、肺泡灌洗液、唾液、紅細(xì)胞裂解液、乳汁、精漿、胸腹水以及植物樣本。
http://www.gocciabike.com.cn/topic/201805141347467275.html

Q11. 不同指標(biāo)的試劑盒的稀釋液、TMB、終止液是否可以混用？

A11. 洗液、TMB、終止液可以混用。其它試劑不能混用，推薦使用試劑盒中配套的試劑。

Q12. 是否有ELISA操作視頻供參考？

A12. 操作視頻如下：
雙抗夾心ELISA實(shí)驗(yàn)操作視頻

鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/DI8DiNDZAo8Wr5ZMtUtJjQ
競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA實(shí)驗(yàn)操作視頻

鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/IQGa3twNZ9MsXJrgDbsggg

小樣本ELISA實(shí)驗(yàn)操作視頻

鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/AmjiP1ooc0WKQtK-x-4-zQ

快捷型ELISA實(shí)驗(yàn)操作視頻
鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/LOl7jO1vyo271ozBhSo_HA