武漢云克隆科技股份有限公司

Q1. 抗體如何保存？

A1. 參見說明書[ STORAGE AND STABILITY ]，不同的抗體產(chǎn)品保存方式也會存在差別。

1）大多數(shù)抗體產(chǎn)品保存方法如下圖，分裝，-20°C凍存，有效期為24個月。

2）熒光素標(biāo)記抗體保存方法以LAC101Hu41（PE-Linked Polyclonal Antibody to Integrin Beta 8 (ITGb8)）為例，需4°C避光保存，有效期為12個月。

Q2. 抗體的濃度是多少？

A2. 參見說明書[ PROPERTIES ]中的“Concentration”。

Q3. 多克隆抗體所識別的抗原表位是哪一段序列？

A3. 多克隆抗體是由多個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的抗體混合物，能夠識別同一抗原（免疫原）的多個不同表位（即抗原決定簇）。以PAB094Mu01（Polyclonal Antibody to Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1)）為例，其免疫原見下圖。

Q4. 單克隆抗體抗原表位是哪一段序列？

A4. 對于單克隆抗體，目前沒有檢測過抗原表位。表位是一個僅包含約8至10個氨基酸的小片段，通常抗原（免疫原）有多個表位。只有當(dāng)免疫原是肽時，表位才會很容易確定。然而，云克隆使用重組蛋白作為免疫原來制備抗體，當(dāng)免疫原是一種含有多個表位的蛋白時，抗體識別表位的鑒定對大多數(shù)生物公司來說是一項(xiàng)艱巨的任務(wù)。所以針對單克隆抗體，我們能確定的是免疫原序列（見說明書），但不能確定所識別的單一表位。

Q5. 云克隆可以提供標(biāo)記抗體嗎？

A5. 云克隆研發(fā)的所有抗體產(chǎn)品，都可以通過偶聯(lián)生產(chǎn)各種標(biāo)記抗體，包括：Biotin、HRP以及約20種熒光素，如FITC、APC、PE、PerCP、Cy系列以及AF系列等。

Q6. 抗體產(chǎn)品是否適用于說明書中未列出的應(yīng)用？

A6. 對于未列出的應(yīng)用，目前暫時未驗(yàn)證。客戶可對應(yīng)用進(jìn)行擴(kuò)展，并分享給我們數(shù)據(jù)，我們可以提供獎勵。

Q7. 抗體的緩沖液可以更換嗎？

A7. 抗體的緩沖液是經(jīng)過驗(yàn)證后優(yōu)選的緩沖體系。如果客戶的實(shí)驗(yàn)對于緩沖液有特別要求，抗體的緩沖液可以更換。除了產(chǎn)品頁面上顯示的原始緩沖液外，云克隆還接受定制配方（不含甘油、不含防腐劑等）。請聯(lián)系云克隆銷售團(tuán)隊(duì)/您當(dāng)?shù)氐慕?jīng)銷商，告知您的需求即可獲取解決方案。

Q8. 當(dāng)同一靶標(biāo)物有多種抗體選擇時，哪一種最適合我的應(yīng)用？

A8. 通常，針對一種靶標(biāo)物，云克隆可提供不止一種抗體產(chǎn)品。建議選用您所需的應(yīng)用中表現(xiàn)最佳的抗體，可以參考產(chǎn)品說明書中驗(yàn)證過的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。如仍需幫助，請聯(lián)系云克隆技術(shù)支持，以助您選擇適合實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的最佳抗體。

Q9. WB實(shí)驗(yàn)條帶為什么與文獻(xiàn)/蛋白分子量不一致？

A9. WB實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的樣本包括重組蛋白和天然樣本。當(dāng)樣本是重組蛋白片段時，分子量與天然蛋白會存在差異，因而條帶大小不同。但是這不影響抗體識別天然樣本，當(dāng)使用天然樣本進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)時，將會獲得與天然蛋白分子量一致的條帶。

以MAA909Hu22（Monoclonal Antibody to Ceruloplasmin (CP)）為例。下圖A檢測樣本為重組人Ceruloplasmin蛋白片段 (Asp789~Gly1065 with N-terminal His Tag)，其分子量為33KDa，所以WB條帶在33KDa。下圖B檢測樣本為天然樣本（人血清），人Ceruloplasmin蛋白由1065個氨基酸組成，預(yù)測分子量為122KDa，且天然蛋白可能經(jīng)歷表達(dá)后修飾（如糖基化、磷酸化、泛素化等），所以WB條帶出現(xiàn)在140KDa。

Q10. 如何選擇第二抗體？

A10. 選擇第二抗體（二抗）是免疫實(shí)驗(yàn)（如Western Blot、ELISA、IF等）中的關(guān)鍵步驟，正確選擇二抗能顯著提高實(shí)驗(yàn)的特異性和信號強(qiáng)度。

選擇二抗主要考慮以下因素：

1）一抗的種屬來源和類型

如果一抗是來源于兔，則選用抗兔IgG，例如羊抗兔，豚鼠抗兔IgG等。

如果一抗是來源于小鼠，則選用抗小鼠IgG，例如羊抗小鼠，兔抗小鼠IgG等。

2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇二抗標(biāo)記物

二抗的標(biāo)記物包括酶、生物素和熒光素等。標(biāo)記物的選擇取決于實(shí)驗(yàn)的類型。WB 和 IHC，通常選用酶標(biāo)二抗，而IF檢測中常使用熒光素標(biāo)記二抗。

Q11. 云克隆可以提供抗體產(chǎn)品定制服務(wù)嗎？

A11. 云克隆可以為客戶提供抗體產(chǎn)品定制服務(wù)，客戶也可以根據(jù)自身的需求靈活地選擇服務(wù)項(xiàng)目或個性化的定制服務(wù)?；诠咀越ǖ耐晟频募夹g(shù)平臺，可提供多克隆抗體制備和單克隆抗體制備定制服務(wù)。

1)多克隆抗體的定制流程：

抗原→免疫動物→抗血清獲取→抗體純化

2)單克隆抗體的定制流程：

抗原→免疫動物→細(xì)胞融合和篩選 →腹水制備/細(xì)胞培養(yǎng)表達(dá)抗體→抗體純化 

3)定制服務(wù)特色

① 擁有專業(yè)從事動物飼養(yǎng)和動物實(shí)驗(yàn)的動物公司，動物死亡率<1%。

② 擁有多種實(shí)驗(yàn)動物可供選擇。

③ 自主研發(fā)有高分子完全佐劑和不完全佐劑，其免疫效果是弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑的2-3倍。

④ 納米乳化技術(shù)。

⑤ Easy-Fusion技術(shù)快速高效制備雜交瘤細(xì)胞。

⑥ 提供Protein A，Protein G，抗原親和純化等多種純化方式。

⑦ 提供抗體標(biāo)記服務(wù)，包括HRP、Biotin以及多種熒光素等。

⑧ 提供Western-blot、ICC/IHC、IP、FACS等多種檢測方式。

Q12. 如何從抗體產(chǎn)品說明書中獲取有效信息？

A12. 客戶咨詢的很多問題都能在產(chǎn)品說明書中找到，如抗體的來源、宿主、純化方法、濃度、規(guī)格、物種交叉、免疫原、適用的實(shí)驗(yàn)以及推薦的抗體工作濃度、抗體buffer、抗體保存方法以及抗體驗(yàn)證結(jié)果圖。

如果已有產(chǎn)品不能滿足客戶需求，請聯(lián)系云克隆技術(shù)支持，以確認(rèn)是否可以按客戶需求制備產(chǎn)品。