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細(xì)胞衰老是一種以細(xì)胞周期阻滯和衰老相關(guān)分泌表型（SASP）為特征的衰老機(jī)制。衰老細(xì)胞的特性包括細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的上調(diào)，包括p16ink4a（由Cdkn2a編碼）上調(diào)、SASP的產(chǎn)生和分泌以及衰老細(xì)胞抗凋亡通路（SCAPs）的激活。臨床前研究表明，針對(duì)衰老細(xì)胞的生存途徑的抗衰老藥物，可以抵抗多個(gè)器官的年齡相關(guān)病癥。不同的抗衰老藥物在體內(nèi)治療衰老和衰老生物標(biāo)志物比較的有效性尚未得到證實(shí)。2024年12月，美國(guó)梅奧診所Marissa J. Schafer教授團(tuán)隊(duì)在《Nature Aging》上發(fā)表了題為“IL-23R is a senescence-linked circulating and tissue biomarker of aging”的研究。研究發(fā)現(xiàn)，血漿蛋白的年齡依賴性變化，包括IL-23R、CCL5和CA13，可以被抗衰治療藥物逆轉(zhuǎn)，這與組織中的表達(dá)差異相對(duì)應(yīng)?？顾ダ现委熕幬锏男Ч⒉痪窒抻谘獫{，還作用于腎臟、肝臟和脂肪組織等關(guān)鍵器官。這些發(fā)現(xiàn)說(shuō)明，抗衰老藥物不僅能顯著改變血液中衰老標(biāo)志物的水平，還能對(duì)器官間信號(hào)傳遞產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響。

1. 不同的血漿蛋白隨年齡而改變

 研究團(tuán)隊(duì)首先試圖通過(guò)Olink近距離延伸分析（PEAs）來(lái)識(shí)別年輕和年老小鼠之間因年齡增長(zhǎng)而改變的循環(huán)生物標(biāo)志物。蛋白譜包括SASP（衰老相關(guān)分泌表型）、炎癥、代謝、發(fā)育、細(xì)胞支架和信號(hào)因子。與年輕雌性相比，老年雌性血漿中4種蛋白（CCL5、CCN1、IL-23R、GCG）水平較高，3種蛋白（CA13、CNTN4、MIA）水平較低。在年輕雄性相比，老年雄性血漿中4個(gè)蛋白（CCL3、CCN1、IL-17A、IL-23R）水平較高，12個(gè)蛋白（CCN4、CDH6、CNTN4、CLMP、CPE、FSTL3、LPL、MIA、NOTCH3、TGFBR3、TNFRSF12A、VSIG2）水平較低。在兩性中，老年血漿中IL-23R和CCN1較高，CNTN4和MIA較低。

圖1. 不同的血漿蛋白隨年齡而改變

2. 衰老組織中的典型衰老標(biāo)志物

假設(shè)在衰老的血漿中增加的蛋白質(zhì)來(lái)源于衰老的細(xì)胞。研究團(tuán)隊(duì)測(cè)量了老年和年輕p16-InkAttac小鼠組織中編碼衰老相關(guān)的基因以及典型衰老標(biāo)記物的表達(dá)。p16ink4a在老年小鼠肝、腎、脾、大腦皮層和雄性腺周脂肪中表達(dá)增加，Il23r在老年雌性肝、腎和脂肪中，以及在老年雄性的肝、肺和脂肪中的表達(dá)較高。p16ink4a、Bcl2a1a、Ccl2、Ccl3、Ccl5、Il1b、Il6和Il23r，以及tnf這些基因的編碼水平與血漿IL-23R、CCL2、CCL3、CCL5和IL-17A表達(dá)水平呈正相關(guān)，這些基因的編碼與血漿蛋白水平相關(guān)，表明這些組織中的衰老細(xì)胞是全身性衰老標(biāo)志物的重要來(lái)源。

圖2. 與衰老相關(guān)的基因在老年p16-InkAttac小鼠中的組織表達(dá)情況

3. 治療衰老的藥物抑制與衰老相關(guān)的血漿蛋白

與年齡相關(guān)的血漿蛋白是否被體內(nèi)靶向衰老細(xì)胞的藥物調(diào)節(jié)呢？體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，抗衰老藥物（VEN、NAV、FIS、LUT、AP）可以降低血漿中IL-23R、CCL5、IL-17A、GCG、CA13的表達(dá)豐度，因此，衰老治療藥物可以降低與年齡相關(guān)的循環(huán)蛋白表達(dá)水平。

圖3. 抗衰藥物可以降低與年齡相關(guān)的循環(huán)蛋白表達(dá)水平

4. 抗衰靶向藥物治療可以逆轉(zhuǎn)組織中Cdk2na的編碼水平

接下來(lái)，研究了抗衰老藥物是否減少了編碼年齡和衰老改變相關(guān)組織中的基因水平。通過(guò)RT-PCR評(píng)估Cdk2na在年輕對(duì)照鼠、老年對(duì)照鼠及抗衰老靶向藥物治療老年鼠的基因水平，發(fā)現(xiàn)AP、VEN和LUT降低了老年雌性小鼠腎臟中Cdkn2a的水平，只有VEN可以降低老年雌性小鼠脾臟中Cdkn2a的表達(dá)，FIS和LUT降低了雄性小鼠皮質(zhì)中的Cdkn2a的水平，FIS降低了Cdkn2a的另外一種轉(zhuǎn)錄變體（p16^ink4a）。

圖4. 抗衰靶向藥物治療逆轉(zhuǎn)組織中Cdk2na的編碼水平

5. Il23r和Ccl5隨著年齡的增長(zhǎng)而增加，并被抗衰老靶向藥物逆轉(zhuǎn)

接下來(lái)測(cè)試了抗衰老藥物是否減輕了與年齡相關(guān)的Il23r和Ccl5轉(zhuǎn)錄水平，通過(guò)RT-PCR評(píng)估Il23r和Ccl5在年輕對(duì)照鼠、老年對(duì)照鼠及抗衰老靶向藥物治療老年鼠的基因水平，發(fā)現(xiàn)Ccl5在老年器官中表現(xiàn)出廣泛的差異表達(dá)，并且在老年脾臟中表達(dá)最多。抗衰老治療后，Il23r和Ccl5在多個(gè)器官中的轉(zhuǎn)錄水平降低?？傊挲g和抗衰老治療基因表達(dá)的變化表明，IL-23R和CCL5是重要的衰老生物標(biāo)志物。

圖5. 抗衰治療能逆轉(zhuǎn)組織中Il23r和Ccl5隨著年齡的增長(zhǎng)而增加的趨勢(shì)

6. 老年人血漿中IL-23R蛋白增加 

IL-23R是一種對(duì)抗衰老治療干預(yù)敏感的年齡增加的血漿蛋白。ELISA檢測(cè)不同年齡的人群中IL-23R的含量變化，發(fā)現(xiàn)血漿蛋白IL-23R隨年齡增加而增加。這表明IL-23R是一種具有潛在臨床應(yīng)用價(jià)值的衰老標(biāo)志物，為衰老治療的臨床應(yīng)用提供了新方向。

圖6. 血漿蛋白IL-23R隨年齡增加而增加

云克隆開(kāi)發(fā)了涉及上述研究相關(guān)靶標(biāo)的蛋白、抗體以及試劑盒產(chǎn)品，靶標(biāo)及核心貨號(hào)如下，供參考：