線粒體與腸道膳食脂質(zhì)代謝


消化的膳食脂肪被腸上皮細(xì)胞(IECs)吸收,它們在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中組裝成前乳糜微粒,然后運(yùn)輸?shù)礁郀柣w進(jìn)行成熟,隨后分泌到循環(huán)中,而線粒體在膳食脂質(zhì)加工中的作用尚不清楚。近期,由德國研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在《Nature》上的題為“Mitochondrial dysfunction abrogates dietary lipid processing in enterocytes”的研究為我們解惑線粒體和膳食脂質(zhì)代謝的關(guān)系。

 

該研究發(fā)現(xiàn)線粒體功能障礙導(dǎo)致乳糜微粒從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體的遷移受損,進(jìn)而導(dǎo)致膳食脂質(zhì)在胞漿中形成大的脂滴。這些結(jié)果揭示了線粒體在腸上皮細(xì)胞膳食脂質(zhì)運(yùn)輸中的作用,這可能有助于了解線粒體疾病患者的腸道缺陷。

1. DARS2缺乏會導(dǎo)致脂質(zhì)聚集在IECs

為了研究線粒體在IECs中的作用,通過Dars2fl/fl小鼠和Vil1-cre小鼠雜交獲得DARS2在IECs特異性敲除的Dars2fl/flVil1-cretg/wt小鼠,即Dars2IEC-KO小鼠,該小鼠表現(xiàn)出體重增長不顯著并存活期不會超過4周。DARS2缺失可抑制線粒體DNA(mtDNA)編碼的呼吸鏈亞基的產(chǎn)生,導(dǎo)致嚴(yán)重的線粒體功能障礙。病理染色結(jié)果顯示Dars2IEC-KO小鼠IECs存在大的胞質(zhì)空泡,證實(shí)了Dars2IEC-KO小鼠IECs含有大的胞質(zhì)脂滴。電鏡結(jié)果顯示Dars2IEC-KO小鼠腸上皮細(xì)胞線粒體腫脹,嵴碎片化。質(zhì)譜介導(dǎo)的脂質(zhì)組學(xué)分析顯示Dars2IEC-KO小鼠腸道脂質(zhì)水平顯著增高,尤其是三?;视停═AG),這表明IECs到肝臟的脂質(zhì)輸送受到了影響。這些結(jié)果說明,IECs中DARS2的缺乏導(dǎo)致膳食脂質(zhì)的運(yùn)輸受損,從而導(dǎo)致脂質(zhì)聚集。Dars2IEC-KO小鼠IECs脂質(zhì)聚集增加可能與飲食高脂肪含量或胚胎發(fā)生過程中DARS2缺失引起的發(fā)育缺陷有關(guān)。這一結(jié)論在正常飲食(NCD)的成年小鼠用他莫昔芬誘導(dǎo)性的敲除DARS2小鼠(即Dars2tamIEC-KO小鼠)進(jìn)一步得到驗(yàn)證,DARS2的敲除會導(dǎo)致代謝缺陷、整合性應(yīng)激反應(yīng)的激活以及近端IECs的脂滴積累。

 

 

                                                                                                  圖1. DARS2缺乏導(dǎo)致IECs中脂質(zhì)聚集

                                                                                                              (圖片來源于《Nature》)

2. DARS2缺失抑制IECs中膳食脂質(zhì)運(yùn)輸

為了評估膳食脂肪在DARS2缺乏的IECs中脂質(zhì)聚集的作用,通過對比Dars2tamIEC-KO小鼠喂養(yǎng)FFD(含有<0.5%的脂肪)和NCD(含有3.4%的脂肪)的膳食飼料觀察FFD飲食是否可以阻止脂質(zhì)在IECs的聚集。發(fā)現(xiàn)FFD飲食Dars2tamIEC-KO小鼠小腸腸上皮細(xì)胞脂質(zhì)聚集顯著減少。為了直接評估DARS2缺乏是否會損害腸細(xì)胞對膳食脂質(zhì)的運(yùn)輸,進(jìn)行了代謝追蹤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Dars2tamIEC-KO小鼠血漿、肝臟等臟器中三油酸、膽固醇和TAG水平顯著降低,說明Dars2tamIEC-KO小鼠三油酸、膽固醇和TAG向血漿、肝臟等外周組織的運(yùn)輸明顯減少,IECs中DARS2的缺失主要影響了膳食脂質(zhì)的運(yùn)輸。

 

                                                                                                                  圖2. DARS2缺失抑制IECs中膳食脂質(zhì)運(yùn)輸

                                                                                                                        (圖片來源于《Nature》)

3. DARS2缺失影響乳糜微粒(CM)產(chǎn)生和高爾基體結(jié)構(gòu)

IECs吸收的大多數(shù)膳食脂質(zhì)以CMs的形式運(yùn)輸?shù)侥c道,而CMs的產(chǎn)生需要將微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MTTP)介導(dǎo)的脂質(zhì)包裝成內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中含有ApoB48的pre-CMs,然后將pre-CMs在囊泡中轉(zhuǎn)移運(yùn)輸?shù)礁郀柣w中進(jìn)行成熟和后期的細(xì)胞外分泌。近端小腸切片的超微結(jié)構(gòu)檢測顯示,在Dars2tamIEC-KO小鼠的IECs中觀察到CMs分泌途徑的廣泛紊亂,大量缺乏含有CMs的高爾基體囊泡,IECs的胞漿中充滿了非常大的脂滴,IECs的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)出現(xiàn)脂質(zhì)顆粒,研究結(jié)果表明DARS2的缺失影響了CMs產(chǎn)生并發(fā)生了進(jìn)行性高爾基體結(jié)構(gòu)紊亂。

 

                                                                                                         圖3. DARS2缺失影響乳糜微粒(CM)產(chǎn)生和高爾基體結(jié)構(gòu)

                                                                                                                                     (圖片來源于《Nature》)

以上研究結(jié)果表明,線粒體功能障礙對IECs膳食脂質(zhì)處理至關(guān)重要,線粒體功能的抑制會導(dǎo)致CMs的產(chǎn)生高爾基體的結(jié)構(gòu)紊亂,且這種效應(yīng)在存在高水平的脂質(zhì)時(shí)會加劇,該研究對線粒體疾病患者腸道并發(fā)癥的研究具有重要意義。

 

云克隆開發(fā)了上述研究中涉及相關(guān)指標(biāo)的蛋白、抗體、試劑盒等產(chǎn)品以助力相關(guān)研究,部分指標(biāo)節(jié)選如下,供參考:

指標(biāo)

核心貨號

指標(biāo)

核心貨號

DARS2

G129

COX1

D283

ATP5a

G388

UQCRC2

G916

SDHB

J756

ACTB

B340

SDH

B495

PLIN2

B350

OLFM4

A162

LGR5

G047

CASP3

A626

CASP8

A853

CD45

B030

EMR1

K446

TAG

B687

HDL

B006

LDL

B107

SDHA

J784

TCA

O267

ATP

A349

ADP

B069

ApoB48

B883

TGN38

H035

E-cadherin

A017

CD36

B530

APOA4

B967

APOA1

A519

MTTP

C641

LSR

D744

ApoB100

A603

 


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