淺談大鼠心肌細胞原代細胞的制備
心肌細胞培養(yǎng)作為一種體外研究模型,可以更便捷的從細胞和分子水平對其生長、發(fā)育、生理、代謝、病理等進行研究。在許多研究領域原代培養(yǎng)心肌細胞作為一種主要的研究模型,被廣泛應用于心血管研究之中。
武漢云克隆動物有限公司憑借多年的實踐經(jīng)驗總結(jié)了一些大鼠心肌原代細胞的處理方法,給大家分享:
1 大鼠的選擇
新生大鼠鼠齡的選擇新生大鼠心肌細胞在出生后3 d內(nèi)具有部分的增殖能力,成年大鼠心肌細胞則為終末分化細胞,不再具有分裂增殖能力。因此,大鼠出生時間越短,其心肌細胞分離后成活率越高,越容易貼壁生長。大量觀測表明,選擇1~3 d齡大鼠分離其心肌細胞進行原代培養(yǎng)較為理想.其中尤以半日齡大鼠心肌細胞培養(yǎng)效果最佳。
2 最常見的酶消化法
0.1%的胰蛋白酶重復消化乳鼠心肌組織多次,收集的細胞用含15%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基混懸后過濾,純化心肌細胞后置CO2培養(yǎng)箱孵育。結(jié)果培養(yǎng)的心肌細胞4~6 h后開始貼壁生長,12~24 h明顯增殖,3~4 d后細胞匯合成片。在倒置顯微鏡下心肌細胞呈圓形,梭形,多角形,伸出偽足,出現(xiàn)自發(fā)性節(jié)律性搏動。結(jié)論應用酶消化法可簡便,快速地獲得大量活力高的心肌細胞。
目前云克隆向市面提供大鼠心肌細胞(MC)原代細胞(不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。)
產(chǎn)品編號CSI007Ra01 品系:SD rat
組織來源:乳鼠心肌組織 生長狀態(tài):貼壁
細胞類型:心肌細胞 疾病:正常 應用:原代細胞
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