緩沖液對于蛋白的影響

蛋白質的分離和純化是一項復雜的任務,每一種蛋白的純化過程都不完全相同,因此在蛋白提取和制備過程中使用適當的蛋白質純化方法,才能獲得穩(wěn)定的蛋白質。在整個過程中,蛋白質的穩(wěn)定取決于所使用的多組分緩沖體系,最佳條件就是既可以溶解蛋白質,又可以保持生物活性。由于大部分的蛋白質純化均在體外進行,所以目前市面上重組蛋白對應的緩沖系統(tǒng)可能地模擬天然蛋白質在體內的條件以期達到蛋白穩(wěn)定保存和運輸的目的。

緩沖液的主要作用是為目標蛋白質提供最適的環(huán)境。在選擇和配制緩沖液的過程中,必須考慮以下幾個因素

1. 緩沖液成分:緩沖液本身的緩沖成分不應與蛋白質發(fā)生相互作用。例如,一些酶被磷酸鹽緩沖液的磷酸鹽基團抑制,會導致蛋白的功能缺失。也說明每種蛋白質適合的緩沖液不完全相同,因此用戶溶解蛋白時應盡量選擇說明書推薦的緩沖液以最大程度保證蛋白的穩(wěn)定性和相應對活性。典型的緩沖液濃度范圍為20至100mM,并且可能需要向離子強度敏感的蛋白質或鎂等金屬離子等添加其他成分(鹽溶液為150mM),這對于某些酶是有活性的而言是必需的。

2. 酸堿度:pH取決于蛋白質的實際應用。如果使用蛋白質進行某種類型的生物測定,例如酶測定,應選擇酶顯示最佳活性的pH。當制備用于純化技術的蛋白質(離子交換,凝膠過濾等)時, pH應根據實驗條件來選擇,以獲得最大的純化效率。當不需要特定的pH時,蛋白質表現出最佳穩(wěn)定性的pH就是最好的,這一點對于蛋白質的儲存尤其如此。

 

云克隆目前可向用戶提供超11000種蛋白(包括活性蛋白),對于這么多蛋白,我們也有對應的各類緩沖系統(tǒng)用于保護蛋白。其中最為常見的是磷酸鹽緩沖體系和tris緩沖體系,最近有很多用戶關于蛋白緩沖液的咨詢,我們都為用戶一一進行了解答。如果您也有關于蛋白緩沖液方面的疑慮,比如是否能夠更換蛋白緩沖液,如何配置蛋白緩沖液等問題,歡迎您來電或留言互動哦!

 云克隆部分緩沖液產品展示:

編號

名稱

規(guī)格

IS045-1

PBS緩沖溶液(干粉) (0.01M,pH7.2-7.6)

1袋/1盒(12袋)

IS045-2

TRIS緩沖溶液(干粉) (0.02M,pH8)

1袋/1盒(12袋)