輕松揮去生物制品中的煩惱——內(nèi)毒素
內(nèi)毒素看似高深莫測(cè),其實(shí)我們每個(gè)人對(duì)他都并不陌生,很多出現(xiàn)過(guò)細(xì)菌感染的人群更對(duì)他記憶深刻,因?yàn)榧?xì)菌感染后高燒的罪魁禍?zhǔn)妆闶莾?nèi)毒素。內(nèi)毒素,也稱(chēng)為脂多糖或LPS,是革蘭氏陰性細(xì)菌(例如大腸桿菌)的細(xì)胞膜組分。當(dāng)細(xì)菌死亡后,便有大量的內(nèi)毒素釋放出來(lái),這部分內(nèi)毒素如果進(jìn)入動(dòng)物血液循環(huán)系統(tǒng),一方面會(huì)大面積的損傷健康細(xì)胞,另一面會(huì)引起強(qiáng)烈的免疫反應(yīng),這便是為什么細(xì)菌感染后會(huì)出現(xiàn)高燒甚至死亡的原因。由此可見(jiàn),內(nèi)毒素對(duì)生物體及細(xì)胞的傷害性,因此國(guó)家對(duì)藥品特別是注射類(lèi)藥物作出了明確的內(nèi)毒素去除的要求,同樣實(shí)驗(yàn)室直接用于細(xì)胞培養(yǎng)、注射實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等試劑也必須限制內(nèi)毒素含量。內(nèi)毒素儼然已成為生物制品制備的最大的煩惱之一。
多粘菌素B(PMB)是由多粘芽胞桿菌(Bacilluspolymyxa)產(chǎn)生的一組多肽類(lèi)抗生素,能夠特異性的抓取試劑中的細(xì)菌內(nèi)毒素,但是又不會(huì)抓取試劑中的其他成分,由此而開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品被認(rèn)為是目前市面上最為有效的去內(nèi)毒素產(chǎn)品。多粘菌素B通常被連接在CNBr-Sepharose上面做成預(yù)裝柱(IS002),方便小批量的去除內(nèi)毒素,使樣品中的內(nèi)毒素含量低于1.0EU /ug,能滿(mǎn)足多種實(shí)驗(yàn)需要,但是這種方法操作比較復(fù)雜,對(duì)于大批量去除內(nèi)毒素它就有點(diǎn)力不從心了。針對(duì)這種情況,我們對(duì)內(nèi)毒素分子的特性做了更為詳細(xì)的分析,研發(fā)了一款操作簡(jiǎn)便、且適用于大批量樣本去除內(nèi)毒素的試劑(IS070),該產(chǎn)品主要通過(guò)物理的方法將內(nèi)毒素直接萃取出來(lái),無(wú)需進(jìn)行過(guò)柱處理,簡(jiǎn)單快捷,并且去除內(nèi)毒素的效果與多粘菌素B類(lèi)產(chǎn)品一致,經(jīng)過(guò)此方法去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品可以直接用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。不過(guò)這個(gè)方法也有一定的缺陷,那就是需要蛋白的耐熱性好,并且不適用于脂溶性的樣本中內(nèi)毒素的去除。所以實(shí)驗(yàn)人員可以依據(jù)樣本的物理、化學(xué)特性以及實(shí)驗(yàn)的用途選擇不同的方式對(duì)樣本進(jìn)行內(nèi)毒素的去除。
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