基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)活性蛋白

Active Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase

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活性實驗

Matrix metalloproteinases are a family of zinc and calcium dependent endopeptidases with the combined ability to degrade all the components of the extracellular matrix. MMP-9 (gelatinase B) can degrade a broad range of substrates including gelatin, collagen types?IV and V, elastin and proteoglycan core protein. It is believed to act synergistically with interstitial collagenase (MMP-1) in the degradation of fibrillar collagens as it degrades their denatured gelatin forms. MMP-9 is produced by keratinocytes, monocytes, macrophages and PMN leukocytes. MMP-9 is present in most cases of inflammatory responses. The activity of recombinant human MMP9 is measured by its ability to cleave a fluorogenic peptide substrate MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2 in the assay buffer 50 mM Tris, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% (w/v) Brij-35, pH 7.5. The rhMMP9 is diluted to 100 ug/ml in assay buffer, then activated by p-aminophenylmercuric acetate (APMA) in a final concentration of 1 mM incubated at 37 °C for 1 hours. The activated rhMMP9 is diluted to 0.2 ug/mL in assay buffer. Loading into a black well plate 50 μL of 0.2 ug/mL rhMMP9 and start the reaction by adding 50 μL of 20 μM substrate, with a substrate blank containing 50 μL assay buffer, 50 μL substrate, and no rhMMP9. Then read at excitiation and emission wavelengths of 320 nm and 405 nm, respectively, in kinetic mode for 5 minutes. The specific activity of recombinant human MMP9 is > 3000 pmol/min/μg.

用法

Reconstitute in 10mM PBS (pH7.4) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.

儲存

避免反復凍融。2-8°C不超過一個月,-80°C不超過12個月。

穩(wěn)定性

熱穩(wěn)定性以損失率顯示。損失率是由加速降解試驗決定,具體方法如下:在37°C孵育48小時,沒有顯著的降解或者沉淀產(chǎn)生。保質(zhì)期內(nèi),在適當?shù)臈l件下存儲,損失率低于5%。

相關(guān)產(chǎn)品

編號適用物種:Homo sapiens (Human,人)應用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!)
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參考文獻

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