細胞色素P450家族成員2E1(CYP2E1)活性蛋白

Active Cytochrome P450 2E1 (CYP2E1)

CPE1; CYPIIE1; P450-J; P450C2E; 4-nitrophenol 2-hydroxylase; Cytochrome P450 Family 2 Subfamily E 1; Cytochrome P450,Subfamily IIE(Ethanol-Inducible)Polypeptide 1

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活性實驗

The cytochrome P450 enzyme CYP2E1 catalyzes the oxidative metabolism of many solvents and other small organic molecules. CYP2E1 is expressed in adult and fetal human liver in addition to extrahepatic tissues such as lung and placenta. Treatment of primary cultures of human hepatocytes with ethanol induces CYP2E1 protein, and this is consistent with the finding that hepatic CYP2E1 protein and mRNA levels are increased in individuals with alcoholism. Although only a few drugs (e.g., acetaminophen have been identified as substrates for CYP2E1, many low molecular weight procarcinogens are activated by this cytochrome P450 (P450). Chlorzoxazone 6-hydroxylation, N-nitrosodimethylamine N-demethylation and p-nitrophenol hydroxylation can be used to measure the catalytic activity of CYP2E1. Thus, the recombinant human CYP2E1 activity was measured by its ability to hydroxylate p-nitrophenol to p-nitrocatechol. The reaction was performed in 50 mM potassium phosphate, pH 7.4 ( Assay Buffer), initiated by addition 20 μL of 500 ug/ml CYP2E1 to 10 μL of 5 mM substrate p-nitrophenol and 30 ul of 26 mM NADPH in a total volume of 500 ul. Incubated at 37 ℃ for 30min, then read at a wavelength of 535 nm after acidification of the reaction mixture with trichloroacetic acid followed by neutralization using 2 M NaOH.

用法

Reconstitute in 10mM PBS (pH7.4) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.

儲存

避免反復凍融。2-8°C不超過一個月,-80°C不超過12個月。

穩(wěn)定性

熱穩(wěn)定性以損失率顯示。損失率是由加速降解試驗決定,具體方法如下:在37°C孵育48小時,沒有顯著的降解或者沉淀產生。保質期內,在適當的條件下存儲,損失率低于5%。

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編號適用物種:Homo sapiens (Human,人)應用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!)
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參考文獻

雜志參考文獻
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